檢驗項目

HBV YMDD mutant基因診斷（B型肝炎YMDD突變）

檢驗表單

精準醫學暨分子醫學特殊檢驗單（CM-T2A0）

生物參考區間

不適用

危險值及通報值

NA

1.採檢容器(圖片) 
2.檢體類別
3.檢體量
4.採檢須知(超連結)

大紫頭管10mL：標準採檢量 血液 10mL

採檢注意事項

(病人準備)

1.不需空腹

2.檢體採集後將採血管上下顛倒3∼5次。

檢體傳送要求

採檢後全血須於2-25℃盡速傳送，最慢須於24小時內送至 精準診斷組，若無法於24小時內送至 精準診斷組,須先將檢體離心1,600xg,20分鐘後,  血漿分裝至無菌試管中於2-8℃或冷凍於-20℃運送。

檢體拒收準則

檢體量不足或血液凝固

可送檢時間

門診檢驗組:星期一∼星期五 AM 07:00∼PM 22:00

                     星期六 AM 07:00∼PM 12:00

急診檢驗組:星期一∼星期五24小時收件

                     星期六 AM 07:00∼PM 12:00

報告完成時間

14個工作天

加補驗原則/條件

不接受加補驗

檢驗組別及聯絡方式

精準診斷組  電話:04-22052121 分機：11202-304

檢驗方法

聚合酶連鎖反應/基因定序分析 polymerase chain reaction/DNA Sequence

檢驗效能

本實驗室確效驗證：偵測極限：大於1000 IU/mL

檢驗結果的解讀

Ｂ型肝炎病毐類屬於”Hepadnaviridae”病毐科，具有外套的部份双股DNA，其中有一片段是單鏈DNA，本身含有DNA polymerase，能夠修補單鏈區域使成為完整雙鏈DNA。HBV的基因大約是3.2kb的DNA。Ｂ型肝炎病毐所以會造成肝臟的傷害，是因為它誘發宿主的免疫反應而造成肝臟的發炎及壞死。因此如能抑制病毐的繁殖甚至清除病毐，就能減輕或終止肝臟的發炎或壞死，進而避免發展為慢性肝炎及肝硬化，也可以減少肝癌的發生。肝安能(Zeffix )為抗Ｂ型肝炎病毐的使用藥物之一，其主要成份為Lamivudine(拉美夫錠)。此藥本為治療愛滋病，後來發現可以抑制Ｂ型肝炎病毐複製。Lamivudine為第一個通過美國FAD核准使用於慢性Ｂ型肝炎治療的核苷類似物。Lamivudine須由感染的細胞吸收進入細胞內，再磷酸化成為Lamivudine triphosphate 後才有抑制病毐的作用。其主要作用機轉為(1)競爭性的抑制Ｂ型肝炎病毐的反轉錄酶(2)Lamivudine會併入HBV DNA的合成鏈中，阻斷DNA進一步的延長，導致DNA合成中斷。每日服用Lamivudine二週可抑制97%的HBV DNA。但是Lamivudine用一段時間後，有些帶原者身上的Ｂ型肝炎病毐會在DNA上變異，用以逃避藥物的抑制作用，此為抗藥性病毐株的產生。此突變種發生的機率也隨著Lamivudine期間的增長而增加，其發生機率服藥一年後是18%，二年後是41%，三年後是53%；四年後是67%。縱使YMDD突變型Ｂ型肝炎病毐出現，仍明顯有較低的HBV DNA，ALT及AST下降且改善肝臟組織。因此YMDD突變型Ｂ型肝炎病毐己在體內型成，持續使用此藥，仍可以抑制殘餘的原始型病毐，而且YMDD突變型Ｂ型肝炎病毐的複製競爭力似乎較弱，因此產生的毐性較原始型Ｂ型肝炎病毐為低每個胺基酸都有其相對應的DNA，也就是說DNA的排列順序將決定胺基酸的種類，所以DNA序列的改變，會產生胺基酸的改變，因此只要測定Ｂ型肝炎病毐本的DNA序列，利用PCR方法即可推斷其胺基酸的種類，檢驗出患者體內是否有抗藥性病毐株的產生。

本實驗室利用PCR技術將HBV基因片段呈幾何級數放大，將PCR產物的基因定序，以檢驗出患者體內是否有抗藥性病毐株的產生。本檢測方法參考J Hepatol. 2012 Jul;57(1):167-85. EASL clinical practice guidelines: Management of chronic hepatitis B virus infection.針對HBV drug resistant (包括：Lamivudine、Telbivudine、Entecavir、Adefovir以及Tenofovir)突變位點進行檢驗。偵測Target gene為HBV reverse transcriptase region (序列出處：AY167095.1/ GI:32346276)  可偵測突變位點包含：rt169、rt173、rt180(原codon528)、rt181、rt184、rt202、rt204(原codon552)、rt236以及rt250。

經本實驗室確效，最低偵測極限為1000 IU/mL。若患者體內病毒量小於1000 IU/mL則無法偵測到病毒DNA不能進行其變異型之判讀；若有偵測到HBV病毒的DNA，則經由定序之結果判讀其胺基酸的序列為突變株，以作為臨床醫師用藥之的參考資料。

健保代碼

NA

幾付點數

NA

自費收費

3800元

委外代檢事項

是否接收代檢■是□否